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DiR 碘化物(細胞膜紅色熒光探針)

簡要描述:DiR 碘化物(細胞膜紅色熒光探針)
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強,這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。

  • 產(chǎn)品型號:D-9111
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2025-02-23
  • 訪  問  量: 570

詳細介紹

品牌Bioss貨號D-9111
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

DiR 碘化物(細胞膜紅色熒光探針)

保存條件 Store at -20℃, protect from light.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強,這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在活體成像中用來示蹤。

儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。

溶解性:可溶于無水乙醇、DMSO和DMF,其中在DMSO中溶解度大于10mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解。

DiR 碘化物(細胞膜紅色熒光探針)

使用方法

1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細胞膜染色液制備

(1)配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。

注意:未使用的儲存液保存在-20 oC,避免反復(fù)凍融。

(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 µM的工作液。

注意:工作液的最終濃度是根據(jù)不同細胞和實驗的經(jīng)驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。

2. 懸浮細胞染色

(1)懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。

(2)在37 ℃培養(yǎng)細胞 2~20分鐘,不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同。

(3)染色細胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。

(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。

(5)重復(fù)(3),(4)步驟兩次以上。

3. 粘壁細胞的染色

(1)使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yǎng)。

(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

(4)在37 ℃培養(yǎng)細胞 2~20分鐘,不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同。

(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。

4. 顯微鏡檢測

(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。

(2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設(shè)定:

a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

5. 流式細胞儀的檢測

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經(jīng)典的FL1,F(xiàn)L2,F(xiàn)L3和FL4流式細胞儀檢測。



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