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大家對生物鏈霉親和素了解多少呢?

更新時間:2023-06-09  |  點(diǎn)擊率:813
  生物鏈霉親和素是與親和素(avidin下稱AV)有相似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì),是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及結(jié)合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點(diǎn)6.0,非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低。
  生物鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈,鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于 10 mol/L 數(shù)量級 ,這一性質(zhì)常用于分子生物學(xué)用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個氨基酸殘基,分子量為16450。
  消光系數(shù)與蛋白中Tyr含量有關(guān), 由于SA 中Tyr的含量比AV 多,所以SA的比消光系數(shù)也較AV 為高,兩者分別為E 1mg/mL=3.40和E1mg/mL=1.57。在282nm 上這兩種蛋白結(jié)合生物素后并不改變其消光系數(shù),而在233nm上,它們結(jié)合生物素后郡便其消光系數(shù)值增高,現(xiàn)在一般都是利用蛋白的這種吸光特點(diǎn)來測定它們的活性。
  生物鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成,其氨基酸組成中,甘氨酸和丙氨酸的含量較大,而且結(jié)合生物素的活性基團(tuán)也是肽鏈中的色氨酸殘基;鏈霉親和素是一種稍偏酸性(pH6.0)的蛋白質(zhì),并且不帶任何糖基。在蛋白水解酶作用下,鏈霉親和素可在N端10~12和C端19-21間斷裂,形成的核心鏈霉親和素仍然保持完整的結(jié)合生物素的能力。鏈霉親和素的活性單位也是以結(jié)合1μg生物素所需的量來表示,1mg鏈霉親和素的最高活性可達(dá)18U。
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