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2022
11-29背景資料β2微球蛋白(β2Microglobulin,β2-MG)由99個(gè)氨基酸組成的內(nèi)源性低分子量血清蛋白,分子質(zhì)量為11.8kDa,由淋巴細(xì)胞、血小板、多形核白細(xì)胞產(chǎn)生。β2-MG是人類白細(xì)胞抗原(HLA)Ⅰ類的β鏈(輕鏈),含有鏈內(nèi)二硫鍵的單個(gè)多肽鏈。β2-MG廣泛存在于血漿、尿液、腦脊液、淋巴細(xì)胞及血小板等表面,量極微。正常人中,β2-MG以相對(duì)恒定的速度合成,并被釋放到體液內(nèi),血清β2-MG極易通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)膜,濾過(guò)的β2-MG幾乎被腎近曲小管細(xì)胞重吸收和降解,不會(huì)...
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11-29背景資料催乳素(Prolactin,PRL)又叫泌乳素、促乳素,是一種由垂體前葉合成并分泌的多肽類激素,由199個(gè)氨基酸殘基組成。PRL在體內(nèi)有多種分子質(zhì)量的存在形式,最常見(jiàn)的為22kDa,還有16kDa等,不同形式的催乳素與不同PRLR(催乳素受體)結(jié)合。PRL的主要作用為促進(jìn)機(jī)體乳腺上皮細(xì)胞的增值和分化,促進(jìn)乳汁合成。一般情況下,健康成年人的血PRL低于25ng/mL,且大多數(shù)會(huì)更低,低于20ng/mL。催乳素的分泌受下丘腦的催乳素釋放因子(促甲狀腺激素釋放激素、血管緊張...
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11-29背景資料鐵蛋白(Ferritin,F(xiàn)ER)是機(jī)體內(nèi)貯存鐵和維持細(xì)胞鐵平衡的一種可溶組織蛋白。鐵蛋白由蛋白質(zhì)外殼(去鐵蛋白)和鐵核心組成,去鐵蛋白一般為外徑約12nm,空囊腔徑長(zhǎng)約8nm的球形籠狀結(jié)構(gòu)。去鐵蛋白通常由24個(gè)亞基組成,每個(gè)單位包括兩種亞基:H亞基(重鏈,主要在心臟)和L亞基(輕鏈,主要在肝臟),其中H型亞基(FerritinHeavyChain,F(xiàn)HL)分子量為22kDa,與中和游離鐵及抗炎有關(guān);L型亞基(FerritinLightChain,F(xiàn)TL)分子量為19...
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11-26生物鏈霉親和素是與親和素(avidin下稱AV)有相似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì),是streptomycesavidinii菌的分泌物,其分子量及結(jié)合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點(diǎn)6.0,非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低。生物鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈,鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于10mol/L數(shù)量級(jí),這一性質(zhì)常用于分子生物學(xué)用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個(gè)氨基酸殘基...
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11-23His標(biāo)簽抗體是由6個(gè)組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門(mén)設(shè)計(jì)用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢(shì),是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測(cè)和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測(cè)His融合表達(dá)蛋白等。然而,目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多,且價(jià)格也十分昂貴。如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體...
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11-17某些熒光物質(zhì)在一定條件下,羊源性成分核酸檢測(cè)PCR-熒光探針試劑盒既能與抗原或抗體結(jié)合。又不影響抗原與抗體的特異性結(jié)合。用熒光抗原或熒光抗體對(duì)待檢標(biāo)本染色后,在熒光顯微鏡下觀察,可看到發(fā)出熒光的抗原抗體復(fù)合物。作為蛋白質(zhì)標(biāo)記用的熒光物質(zhì)需具備如下條件:①有與蛋白質(zhì)分子形成穩(wěn)定共價(jià)鍵的化學(xué)基團(tuán),但不形成有害產(chǎn)物;②熒光效率高,與蛋白質(zhì)結(jié)合的需要量少;③結(jié)合物在一般條件下穩(wěn)定,結(jié)合后又不影響免疫活性;④作為組織學(xué)標(biāo)記,結(jié)合物的熒光必須與組織的自發(fā)熒光有良好的反襯;⑤結(jié)合程序簡(jiǎn)單,...
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11-12熒光抗體操作過(guò)程為何要避光?(1)生物化學(xué)反應(yīng)需要酶的催化作用,所以熒光素在熒光素酶和ATP等物質(zhì)的參與下可進(jìn)行反應(yīng)發(fā)出熒光.ATP是生命活動(dòng)能量的直接來(lái)源,發(fā)光強(qiáng)度與ATP的含量成正比,所以根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度可以計(jì)算出生物組織中ATP的含量。(2)影響酶活性的外界因素有溫度和pH,其中維持溶液pH的相對(duì)穩(wěn)定時(shí)常常使用緩沖液.分光光度計(jì)反應(yīng)室內(nèi)發(fā)生的能量轉(zhuǎn)換是ATP中活躍的化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。(3)熒光素酶濃度不同,但發(fā)光強(qiáng)度相同,由于受ATP數(shù)量限制,發(fā)光強(qiáng)度也不再增加。(4)每個(gè)...
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11-7是否還在為找不到合適的熒光抗體而發(fā)愁?是否還在為繁瑣的標(biāo)記步驟而心煩意亂?是否還在為昂貴的熒光抗體價(jià)格而無(wú)可奈何?Bioss熒光素抗體標(biāo)記試劑盒讓您輕松穩(wěn)“熒”。背景資料免疫熒光標(biāo)記技術(shù)(ImmunofluorescenceTechnique)是近年發(fā)展起來(lái)的一門(mén)廣泛用于現(xiàn)代生物學(xué)的新興技術(shù),通過(guò)化學(xué)方法將熒光素與特異性抗體共價(jià)結(jié)合,形成熒光素-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光標(biāo)記抗體,不僅保留了抗體活性,同時(shí)還具有熒光素的示蹤作用,當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原起反應(yīng)時(shí),在熒光顯微鏡下就可以看見(jiàn)發(fā)...
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