（注：電泳推薦使用配套贈(zèng)送的MOPS running buffer，對(duì)于小分子量蛋白，也可使用MES緩沖液。請(qǐng)勿使用Tris-Glycine Running Buffer代替，電泳緩沖液反復(fù)使用次數(shù)建議不超過(guò)3次）

在蛋白實(shí)驗(yàn)中，通常使用固定濃度膠和梯度膠兩種，與固定濃度膠相比，顯然梯度膠具有更大優(yōu)勢(shì)。首先，梯度膠的分離范圍更寬，可以同時(shí)分離較大范圍分子量的蛋白質(zhì)。梯度膠的頂部孔徑較大，底部孔徑較小，分子量較大的蛋白質(zhì)可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離，同時(shí)分子量較小的蛋白質(zhì)可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離。

另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是梯度膠可以分辨分子量相差較小，在固定濃度膠中不能分辨的蛋白質(zhì)。電泳過(guò)程中，蛋白質(zhì)在梯度膠中遷移，經(jīng)過(guò)的孔徑越來(lái)越小，直到凝膠的孔徑不能通透，這樣電泳過(guò)程中蛋白質(zhì)就被濃縮，集中在一個(gè)很窄的區(qū)帶中。而分子量略小的蛋白質(zhì)可以遷移得更靠前一些，被集中在略前面的區(qū)帶中。由于梯度凝膠孔徑逐步變小，在蛋白質(zhì)不能通透的孔徑附近對(duì)蛋白有濃縮作用，所以電泳后形成很窄的區(qū)帶，可以分辨出分子量相差較小的蛋白質(zhì)。

凝膠分離范圍

 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1.方便：即開(kāi)即用，無(wú)需配制溶液和灌膠操作，并附送足量的電泳緩沖液，簡(jiǎn)化操作步驟，縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間，每天都有新結(jié)果；

2.快捷：電泳時(shí)間短，在150V電壓下，電泳40-50分鐘即可完成，再也不用熬夜做WB啦；

3.安全：無(wú)需接觸有毒、刺激性試劑，和屏住呼吸加試劑say byebye；

4.兼容性強(qiáng)：兼容目前市場(chǎng)各種電泳槽，無(wú)論是BIORAD，天能還是君意東方，通通百搭；

5.應(yīng)用廣泛：SDS變性及非變性電泳一膠搞定；

6.重復(fù)性好：通過(guò)全自動(dòng)、大規(guī)模的凝膠灌注技術(shù)，品質(zhì)穩(wěn)定，保證每片膠之間良好的重復(fù)性，重復(fù)實(shí)驗(yàn)補(bǔ)數(shù)據(jù)也不怕；

7.結(jié)果清晰：凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰，銳利，均勻，分辨率更高；配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液，可以提高凝膠穩(wěn)定性并避免蛋白在電泳過(guò)程中的再修飾。條帶平整、清晰、銳利，無(wú)邊緣效應(yīng)，讓你的WB結(jié)果張張精品。

 常見(jiàn)問(wèn)題解答：

1.指示劑偏斜

可能原因：電泳槽漏液

解決辦法：調(diào)整膠板位置，檢查密封條。

2.蛋白條帶拖尾

可能原因：樣品溶解不佳或者降解

解決辦法：樣品加熱，離心取上清或重新制備新鮮樣品。

3.指示劑呈倒三角狀，即兩邊低、中間高，形成峰頂

可能原因：內(nèi)、外槽電泳液量不夠

解決辦法：補(bǔ)滿內(nèi)槽電泳液，外槽電泳液補(bǔ)至2/3高度。

4.指示劑出現(xiàn)弧度

可能原因：底部出口被電泳槽上膠條部分覆蓋或者膠板底部沒(méi)卡緊

解決辦法：調(diào)整膠板位置，避免底部出口和膠條重合。

5.上半部分蛋白條帶無(wú)端消失

可能原因：內(nèi)槽或樣品被蛋白酶污染

解決辦法：清洗實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑、儀器，避免被蛋白酶污染。

6.WB曝光圖蛋白條帶不完整

可能原因：濕轉(zhuǎn)時(shí)海綿里面有氣泡沒(méi)有排干凈或者夾子沒(méi)夾緊

解決辦法：將海綿里面的氣泡排干凈；調(diào)整夾子的位置。

7.樣品條帶在凝膠中擴(kuò)散狀

可能原因：樣品含鹽類(lèi)過(guò)多

解決辦法：采用透析或者超濾除鹽。