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新品上市丨Bioss助您解決“膠”慮 WB條帶更加清晰

更新時間:2023-05-16  |  點擊率:1117


“梯度膠的各種試劑濃度讓人頭暈眼花;
一次配四塊膠,手忙腳亂一上午時間就過完了;

可以保溫杯里泡枸杞,卻拯救不了配膠試劑影響身體;

辛辛苦苦制完膠,怎么又出現(xiàn)漏膠/凝膠太慢/膠孔殘缺,今天又要加班了;
條帶歪歪扭扭,難入導師法眼,唉,又要重新來過。"
這是不是也是你在做WB時的感嘆?
快來看看Bioss全新推出的Precast Gels (Bis-Tris, MOPS)蛋白預制膠Bioss助您解決“膠"慮,讓WB條帶更加清晰。



產(chǎn)品信息:

本產(chǎn)品為Bis-Tris聚丙烯酰胺電泳預制凝膠,可用于蛋白質分離實驗,單片膠為15孔,每孔最大上樣量為25 μl,推薦上樣量10-15 μl。凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩(wěn)定性,并避免蛋白在電泳過程中的再修飾。

(注:電泳推薦使用配套贈送的MOPS running buffer,對于小分子量蛋白,也可使用MES緩沖液。請勿使用Tris-Glycine Running Buffer代替,電泳緩沖液反復使用次數(shù)建議不超過3次)


預制膠選擇指南

在蛋白實驗中,通常使用固定濃度膠梯度膠兩種,與固定濃度膠相比,顯然梯度膠具有更大優(yōu)勢。首先,梯度膠的分離范圍更寬,可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質。梯度膠的頂部孔徑較大,底部孔徑較小,分子量較大的蛋白質可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離,同時分子量較小的蛋白質可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離。

另一個優(yōu)點是梯度膠可以分辨分子量相差較小,在固定濃度膠中不能分辨的蛋白質。電泳過程中,蛋白質在梯度膠中遷移,經(jīng)過的孔徑越來越小,直到凝膠的孔徑不能通透,這樣電泳過程中蛋白質就被濃縮,集中在一個很窄的區(qū)帶中。而分子量略小的蛋白質可以遷移得更靠前一些,被集中在略前面的區(qū)帶中。由于梯度凝膠孔徑逐步變小,在蛋白質不能通透的孔徑附近對蛋白有濃縮作用,所以電泳后形成很窄的區(qū)帶,可以分辨出分子量相差較小的蛋白質。

在蛋白分離范圍相同的情況下,梯度膠的選擇主要取決于目的蛋白的大小,雖然都可以分離10-250 kD的蛋白,但濃度為4-12%的梯度膠對55 kD以上的蛋白分離效果更好,而濃度為4-20%的梯度膠則更利于分離55 kD以下的蛋白。

凝膠分離范圍






產(chǎn)品優(yōu)勢及

常見問題解答

 產(chǎn)品優(yōu)勢:

1.方便:即開即用,無需配制溶液和灌膠操作,附送足量的電泳緩沖液,簡化操作步驟,縮短實驗時間,每天都有新結果;

2.快捷:電泳時間短,在150V電壓下,電泳40-50分鐘即可完成,再也不用熬夜做WB啦;

3.安全:無需接觸有毒、刺激性試劑,和屏住呼吸加試劑say byebye;

4.兼容性強:兼容目前市場各種電泳槽,無論是BIORAD,天能還是君意東方,通通百搭;

5.應用廣泛:SDS變性及非變性電泳一膠搞定;

6.重復性好:通過全自動、大規(guī)模的凝膠灌注技術,品質穩(wěn)定,保證每片膠之間良好的重復性,重復實驗補數(shù)據(jù)也不怕;

7.結果清晰:凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩(wěn)定性并避免蛋白在電泳過程中的再修飾。條帶平整、清晰、銳利,無邊緣效應,讓你的WB結果張張精品。


 常見問題解答:

1.指示劑偏斜

可能原因:電泳槽漏液

解決辦法:調整膠板位置,檢查密封條。

2.蛋白條帶拖尾

可能原因:樣品溶解不佳或者降解

解決辦法:樣品加熱,離心取上清或重新制備新鮮樣品。

3.指示劑呈倒三角狀,即兩邊低、中間高,形成峰頂

可能原因:內、外槽電泳液量不夠

解決辦法:補滿內槽電泳液,外槽電泳液補至2/3高度。

4.指示劑出現(xiàn)弧度

可能原因:底部出口被電泳槽上膠條部分覆蓋或者膠板底部沒卡緊

解決辦法:調整膠板位置,避免底部出口和膠條重合。

5.上半部分蛋白條帶無端消失

可能原因:內槽或樣品被蛋白酶污染

解決辦法:清洗實驗相關試劑、儀器,避免被蛋白酶污染。

6.WB曝光圖蛋白條帶不完整

可能原因:濕轉時海綿里面有氣泡沒有排干凈或者夾子沒夾緊

解決辦法:將海綿里面的氣泡排干凈;調整夾子的位置。

7.樣品條帶在凝膠中擴散狀

可能原因:樣品含鹽類過多

解決辦法:采用透析或者超濾除鹽。




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